فایل های مشابه شاید از این ها هم خوشتان بیاید !!!!
توضیحات محصول دانلود کروماتوگرافی با پروتئین A به صورت ورد docx (کد1150)
دانلود کروماتوگرافی با پروتئین A به صورت ورد docx
\n\n عنوان های پاورپوینت :
\n\nپروتیین A کروماتوگرافی\n(پروتکل شماره یک)\nمواد :\nروش :\nکاربرد PURE1A:\nویژگی ها و فواید :\nاصول\nاختصاصیت :\nمواد و ابزار :\nفرایند :\nمنابع :
\n \n\n
\n\nقسمت ها و تکه های اتفاقی از فایل\n\n \n\nپروتیین A به عنوان یک جزء از دیواره سلولی باکتری استافیلوکوک اورِءوس می باشد. این پروتیین شامل یک زنجیره پلی پپتیدی تک در فرم استوانه ای است که محتوی پنج دامین بسیار همولوگ باند شونده به انتی بادی می باشد.\nجایگاه اتصال پروتیین A بر روی پروتیین FC ی IgG1 قرار دارد. اتصال از طریق القای پیوند هیدروفوبیک اتفاق خواهد افتاد و به وسیله افزودن نمک هایی از قبیل سدیم سیترات و سدیم سولفات ، شدت خواهد یافت. درمرکز FC binding site همانند پروتیین A ، رزیدوهای هیستیدین مستقر هستند .\nدر PH آلکالین ، این رزیدوها بدون بار و به صورت هیدروفوبیک هستند که باعث تقویت برهمکنش میان پروتیین A و آنتی بادی میگردد . هنگامیکه PH به حالت اسیدی شیفت پیدا کند ، این رزیدوها باردار شده و یکدیگر را دفع می کند . تفاوت ها در خصوصیات Ehution وابسته به PH ( همانند گونه های مختلف به علت تفاوت های جزیی در جایگاه اتصال )در کلاس های مختلف آنتی بادی مشاهده شده است . این تفاوت ها می تواند به صورت موفقیت آمیز تمایز بین IgG گاوی و IgG موشی را به دنبال داشته باشد.\nدر جدول زیر affinity پروتیین A برای ساب کلاس ها و گونه های مختلف IgG مشخص شده است. هم چنین PH مربوط به اتصال و elution ذکر گردیده است.\nجذابیت اصلی دراستفاده از پروتیین A ، سادگی ان است .\nبه صورت کلی ، آنتی بادی از یک کشت سلولی (مایع رویی ) روی ژل پروتیین A به صورت سطحی جذب میگردد و درون ستون pack میشود. مواد جذب نشده طی شست وشو خارج میشوند و آنتی بادی در شرایط PH اسیدی elute می شود. Recovered Ab معمولا درجه خلوص بالای 90% خواهد داشت (اغلب اوقات با full recovery در فعالیت ایمونولوژیکال)\nپروتکل شماره یک توضیحات دقیق تری از خالص سازی برای انتی بادی های با affinity بالا ذکر میکند :\n(پروتکل شماره یک)\nخالص سازی جنرال IgG انسانی ، IgG انسانی شده و IgG2a وIgG2bی موشی :\nاین پروتکل به منظور خالص سازی انتی بادی های مونوکلونال با افینیتی بالا از کلاس IgG از سوپ رویی کشت سلولی سلولهای هیبریدوما و مایع جمع شده در شکم (ascitic fluid ) طراحی شده است.\nمواد :\n1 ) بافرA : 50mM تریس – HCL / PH =7.5.\n2 ) بافر B : 50 mM تریس – HCL ، 500mM NaCl / PH=8.0\n3 ) بافر C :100mMبافر استات، 50mM NaCl / PH = 3.0\n4 ) بافر D :10Mm NaOH\nروش :\n1) 10ml ستون ژل پروتیین A را pack کنید.\n2) همه ی مواد را به دمای اتاق برسانید.\n3) ستون پروتیین A را با 5cv (cv= column volume) به تعادل برسانید.\n4) سوپ رویی را درون ستون پروتیین A به صورت 5 میلی لیتر / دقیقه LOAD کنید\n5) به ازای هر 1ml ژلmg 20 انتی بادی اضافه کنید.\n6) با 10cv از بافر شماره B شستشو دهید.\n7) انتی بادی ها را با 5cv از بافر C رقیق کنید.\n8) ستون را با 2cv از بافر A به تعادل مجدد برسانید.\n9) ابتدا با 5cv از بافر E شستشو دهید سپس همین کار را با 10cv از بافر A انجام دهید.\n\n \n\n30 تا 70 درصد پروژه||پاورپوینت||سمینار||طرح های کارآفرینی و توجیهی|| پایان-نامه|| پی دی اف مقاله ( کتاب )||نقشه||پلان طراحی | های آماده به صورت رایگان میباشد ( word | pdf | docx | doc )
